3 Fabricantes de Espectrofluorómetros en 2024

¿Qué es un Espectrofluorómetros?

Es un instrumento que analiza la luz emitida por las moléculas y los iones de una muestra.

Es un tipo de espectrofotómetro; otros ejemplos son los espectrofotómetros UV/visible y los espectrofotómetros infrarrojos. Como el espectro de emisión difiere para cada molécula e ion, es posible cuantificar los componentes contenidos en una muestra basándose en la longitud de onda y la intensidad de los picos de emisión.

Los espectrofluorómetros son extremadamente sensibles y se utilizan para detectar trazas de componentes. También se utilizan en bioquímica para analizar el movimiento de las proteínas in vivo combinándolas con sondas fluorescentes que se unen a compuestos específicos.

En muestras que contienen múltiples componentes, como organismos vivos y alimentos, la luminiscencia de cada componente se solapa, lo que da lugar a espectros complejos, pero recientemente se han aplicado métodos de análisis estadístico, como el análisis multivariante, para extraer información sobre muchos componentes.

Usos de la Espectrofluorometría

El análisis cuantitativo por espectrofluorometría suele ser 1.000 veces más sensible que la espectrofotometría de absorbancia, por lo que los espectrofluorómetros se utilizan para detectar y cuantificar cantidades muy pequeñas de componentes en una muestra.

Algunos ejemplos concretos son la medición del rendimiento cuántico, que es un indicador de la eficiencia luminosa de los LED blancos y los elementos EL orgánicos, y el análisis espectral de la luz emitida por los elementos. El análisis espectral es extremadamente complejo, pero el software de análisis es cada vez más sofisticado y puede extraer una amplia gama de información.

Principios de los Espectrofluorómetros

Los espectrofluorómetros utilizan la fluorescencia (o fosforescencia), que es la energía extra emitida en forma de luz cuando los electrones de las moléculas y los iones vuelven de su estado excitado a su estado básico. Cada molécula tiene su propio estado energético específico y absorbe selectivamente la luz de una longitud de onda determinada para pasar al estado excitado.

Los electrones en el estado excitado vuelven inmediatamente al estado de masa, momento en el que emiten luz con una longitud de onda correspondiente a la diferencia de niveles de energía entre los estados excitado y de masa. Si la luz irradiada no tiene una longitud de onda que sea absorbida por la muestra, no se emite fluorescencia y no se puede realizar la medición.

Más Información sobre Espectrofluorómetros

1. Espectrofluorómetros y Análisis Multivariante

Las mediciones de fluorescencia en muestras que contienen un gran número de sustancias orgánicas, como los productos alimenticios, se han utilizado para intentar realizar análisis que clasifiquen los patrones por origen o materia prima. Cuando una muestra contiene varios componentes, el espectro obtenido por el espectrofluorómetros es la suma de la fluorescencia emitida por cada componente.

En general, el espectro de fluorescencia de una muestra que contiene varios componentes es muy complejo y difícil de analizar. En particular, las muestras que contienen un gran número de sustancias orgánicas, como alimentos y bebidas, producirán numerosos picos que sólo pueden ser analizados por una persona experta.

Por otra parte, recientemente se ha intentado obtener información a partir de espectros de emisión complejos de alimentos y otras sustancias utilizando métodos de análisis multivariante y análisis estadístico. Por ejemplo, el análisis de componentes principales (ACP), uno de los métodos de análisis multivariante, puede utilizarse para comprimir datos multidimensionales como los espectros en dos o tres dimensiones inferiores.

Tras la compresión tridimensional, la distribución de cada muestra puede utilizarse para el análisis de agrupación.

2. Uso del Espectrofluorómetro en Bioquímica

En el campo de la bioquímica, es posible cuantificar los componentes relevantes mediante la unión selectiva de sondas fluorescentes a proteínas o iones de calcio específicos. Por ejemplo, en la detección de iones de calcio, se pueden utilizar compuestos con una estructura que atrapa selectivamente los iones, denominados agentes quelantes.

También se utilizan como sondas fluorescentes otros polímeros modificados a partir de proteínas fluorescentes de origen biológico. Estas macromoléculas derivan de proteínas fluorescentes y, una vez introducidas, pueden ser replicadas por las propias células vivas.

El descubrimiento de la proteína verde fluorescente se atribuye al científico japonés Osamu Shimomura, galardonado con el Premio Nobel. La capacidad de introducir proteínas fluorescentes en biomoléculas y detectarlas con gran sensibilidad mediante un fluorómetro ha hecho avanzar enormemente el análisis de biomoléculas.